背景描述:
胶原酶(collagenases),基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, mmp)家族的成员之一,属于内肽酶类,在三螺旋区降解天然胶原,参与结蹄组织的生理和病理周转过程。胶原是动物基质结蹄组织的主要纤维成分。胶原酶可能在肿瘤细胞转移的多个阶段中,对肿瘤细胞侵袭穿透细胞外基质的过程起到促进作用。胶原酶已被支持用于临床治疗杜普征氏掌挛缩(dupuytren's contracture),佩罗尼氏病(peyronie's disease)和伤口愈合。
胶原酶活性检测方法很多,传统的方法包括胶原酶谱法(collagen zymography),该法首先将样本加入含胶原的sds-page凝胶中电泳,然后在适当缓冲液中复性12-16h,最后染色。当底物被酶降解,在整个黑色的背景中能看到清晰透明的降解条带,从而来判断是否存在胶原酶活性。该方法不仅费力费时,且很可能因复性不完全逆转,导致酶活性降低,结果出现较大偏差。
rapid collagenase assay kit (i) and (ii)(chondrex, inc)
1. 试剂盒优势
含有测定胶原酶活性的所有必要成分包括重组人mmp-8(用作对照)和两种类型的胶原酶活化剂。
不同于抗体为基础的elisa试剂盒仅能检测酶蛋白的存在,这些试剂盒目的在于测定酶活性。
试剂盒使用fitc标记的可溶性牛i型胶原或ii型胶原为底物,只需2h就能完成测试。
比底物凝胶分析法(酶谱法)快10倍,检测灵敏度比放射同位素标记胶原法更灵敏。
2. 特异性
哺乳动物胶原酶
1.3 工作原理
哺乳动物胶原酶切割胶原分子上的所有三个α链,产生3/4和1/4大小的胶原片段,tca和tcb,这两个片段的变性温度分别为34-35℃和28-29℃,而所有完整胶原(天然胶原)的变性温度是40℃。因此,35℃下这些切割片段能选择性变性为随机的螺旋构象,能够被一种有机溶剂提取出来。为了缩短变性过程(通常需60min),一种蛋白酶被引入用来进一步消化胶原酶降解后的产物。
1.4 反应步骤
1.5 试剂盒订购
货号
名称
规格
3014
bacterial collagenase assay kit
100 assays
3001
rapid collagenase assay kit with type i collagen substrate
100 assays
3002
rapid collagenase assay kit with type ii collagen substrate
100 assays
3003
mmp-13 inhibitor assay kit
100 assays
北京博蕾德科技发展有限公司
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