球菌 绿科生物 粪链球菌厂家
基于特异性引物的pcr的方法具备快速、准确、低成本的优点，目前被广泛用于转基因、食源性微生物、医学病原菌等方面的检测[3-5]。目前pcr法已经被应用于植物乳杆菌的检测，kwon等[6]建立用于检测植物乳杆菌的普通pcr特异性引物；杨小红等[7]建立了普通pcr法检测植物乳杆菌，并用40株标准菌株验证了方法的特异性，并将该特异性引物成功转化成为标准ny/t 2066—2011[8]。以往报道的特异性引物检测植物乳杆菌全部使用的是普通引物，需要严格控制反应条件尤其是退火温度，退火温度的变化可能会影响到引物的特异性，例如标准ny/t 2066—2011中所使用的植物乳杆菌特异性引物以较高的退火温度(67℃)来保证引物的特异性。而不同实验室之间由于仪器、人员等差异，可能会无法精准重复出试验的各项条件，导致检测特异性受到影响，可能造成误判，而且普通pcr法需要进一步凝电泳判断结果，增加了检测时间。
植物乳杆菌通过与病原菌对限制性营养素的能力竞争, 来抑制病原菌的生长, 调节肠道微生态的组成, 形成生物学屏障。同时, 通过其代谢所产生的代谢产物乳酸、细菌素、以及双乙酰对其它细菌的作用, 调整菌群之间的关系, 维持和保证菌群优势组合以及这种组合的稳定, 阻止了致病菌的定殖和入侵, 拮抗致病菌和有害微生物的生长和粘附。
乳酸菌的分离、鉴定:无菌操作条件下，称取5g泡菜，碾碎，加入装有玻璃珠的三角瓶中，再加入50ml灭菌生理盐水，充分震荡后用生理盐水做10倍的梯度稀释，取10-4和10-5稀释度做平板涂布，置于37℃生化培养箱培养24h。选取表面光滑凸起，周边整齐，直径1.0～1.5mm的菌落，做革兰氏染色，再对革兰氏阳性杆状无芽孢菌落，多次划线培养直至得到纯菌株。最后依据《常见细菌系统鉴定手册》对菌株进行生理生化实验。
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