高效RIPA裂解液操作时这一步很关键！

高效ripa裂解液操作时这一步很关键！
本品为高效组织细胞裂解液。主要用于从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。组织活细胞本产品配有一支pmsf（0.3ml/1.5ml），pmsf请于-20℃保存。
别名：蛋白提取试剂盒
英文名称： ripa buffer(high)
储存条件：附件pmsf-20℃，裂解液4℃。有效期1年
外观（性状）：黄色澄清液体
单位：瓶
使用说明
如发现ripa有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量，取每1ml ripa 加入10ul pmsf，使pmsf的最终浓度为1mm。混匀备用（pmsf现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 pbs、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
信帆生物对质量的控制涵盖生产、放行、市场质量反馈的全过程,包括原辅料、包装材料、工艺用水、中间过程及成品的质量标准和分析方法的建立、取样、检验和产品稳定性考察和市场不良反馈样品的复核等工作,确保产品的精确度、稳定性。我们确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。
注意事项：
本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳；若想测定浓度，可入加少量 sds（1%），煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择bca法或者lowry法检测蛋白浓度。
高效ripa裂解液操作时这一步很关键！

南京信帆生物技术有限公司

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