人乳腺癌紫杉醇耐药株MCF7/Taxol说明书

人乳腺癌紫杉醇耐药株mcf7/taxol说明书
细胞名称：
人乳腺癌紫杉醇耐药株mcf7/taxol
细胞形态：
上皮样
规格：
t25瓶或者2ml冻存管
生长特性：
贴壁生长
传代比例：
细胞80%汇合时 1:2~1:4传代
培养条件：
1640培养基，90%；优质胎牛血清，10%；300 nm，taxol； 37℃、5%co2
仅供科研使用，不可用于临床诊断和治疗
冻存细胞接收后的处理：
1）干冰运输，收到细胞后立即转入液氮或直接复苏；
2）收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。
人乳腺癌紫杉醇耐药株mcf7/taxol说明书复苏细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。
2）75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。
3）建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。
4）如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（t25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，t25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000rpm左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好是进行细胞冻存
①弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次，加入2ml0.25%胰酶（t25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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